期刊信息
主办:中国中医科学院中药研究所;中华中医药学会
主管:国家中医药管理局
ISSN:1005-9903
CN:11-3495/R
语言:中文
周期:半月
影响因子:1.817375
数据库收录:
北大核心期刊(2008版);北大核心期刊(2011版);北大核心期刊(2014版);北大核心期刊(2017版);化学文摘(网络版);中国科学引文数据库(2015-2016);中国科学引文数据库(2017-2018);中国科学引文数据库(2019-2020);日本科学技术振兴机构数据库;中国科技核心期刊;期刊分类:中药学
期刊热词:
药理
透骨消痛胶囊干预早期骨关节炎滑膜水肿模型大(4)
【作者】网站采编
【关键词】
【摘要】图 1 |小动物MRI 显示大鼠膝关节矢状面成像(T2 序列)(标尺=1 mm)Figure 1 |Sagittal plane T2 sequence imaging of the rat knee joints (scale bar=1 mm)图注:箭头所示为关节液;
图 1 |小动物MRI 显示大鼠膝关节矢状面成像(T2 序列)(标尺=1 mm)Figure 1 |Sagittal plane T2 sequence imaging of the rat knee joints (scale bar=1 mm)图注:箭头所示为关节液;三角所示为滑膜增生;星号所示为关节肿胀
图 2 |光镜观察大鼠滑膜组织病理变化(苏木精-伊红染色,×200, 标尺=30 μm)Figure 2 |Pathological observation of rat synovial tissue under light microscope (hematoxylin-eosin staining, ×200, scale bar=30 μm)图注:黄色箭头所指为滑膜细胞层,细胞层下部分均为滑膜下层,红色箭头所指为血管增生,黑色箭头所指为炎症细胞,蓝色箭头所指为结缔组织增生
图 3 |电镜观察大鼠滑膜细胞超微结构变化(×25 000,标尺=500 nm)Figure 3 |Ultrastructure of synovial cells in rats under electron microscope (×25 000, scale bar=500 nm)图注:Ly 为溶酶体;RER 为粗面内质网;Go 为高尔基体
图 4 |免疫组化法观察大鼠滑膜水通道蛋白1 和水通道蛋白3 表达(×200,标尺=50 μm)Figure 4 |Immunohistochemical observation of synovial aquaporins 1 and 3 (×200, scale bar=50 μm)图注:中药组水通道蛋白1 和水通道蛋白3 阳性面积比模型组显著减少
此次研究结果显示,骨关节炎早期模型大鼠用药后核磁影像显示滑膜增生明显减轻,关节积液较模型组明显减少。组织显微结构显示,用药后的滑膜细胞由数层减少至一两层,4 项组织病理评分均降低,可见透骨消痛胶囊明显减轻了滑膜炎症。用药后的血清和关节液中炎症因子白细胞介素1β 和肿瘤坏死因子α 表达明显下降,表明透骨消痛胶囊改变了骨关节炎关节液中炎性因子高表达的状态,能够维持滑膜细胞内外环境的相对稳定,改善滑膜炎症,同时还降低血液中炎症因子的含量,从而维持机体免疫系统的稳定。
3.2 中药通过调节水通道蛋白表达缓解关节水肿 关节液中包含水和大量营养物质,其中水分比例高达96%。关节液流出的量及成分均与滑膜内皮细胞的通透性有关。值得注意的是,组织细胞间水分子转运需要蛋白通道的介导,水通道蛋白具有水转运的高效选择性,参与水的双向转运,调节细胞内外水平衡[21]。因此细胞膜上水通道蛋白的表达量和分布直接影响着水的转运效率,在骨关节炎炎症水肿的发生、发展过程中起至关重要作用。水通道蛋白的表达受离子浓度和渗透压调节,其启动子区含有渗透压反应元件,高渗环境可使水通道蛋白表达量上升[22]。由于骨关节炎的滑膜上皮屏障破坏,导致关节腔中滑液蛋白增加,腔内渗透压升高,滑膜水通道蛋白表达上调,滑液分泌能力增加,关节腔积液进而水肿。
该课题对滑膜水通道蛋白1 和水通道蛋白3 蛋白进行定量和定位,发现病变滑膜明显增生,两种水通道蛋白含量也明显增加,分布于增生的滑膜细胞各层,主要定位于细胞膜和核周细胞质,有明显聚集现象。电镜下可见病变滑膜细胞胞质内细胞和周围的粗面内质网和高尔基体等细胞器活跃,且有丰富的囊泡进行转运,可能与水通道蛋白的蛋白合成、加工和运输密切相关。骨关节炎早期模型大鼠用药后滑膜细胞增生明显下降,细胞中粗面内质网、高尔基体和运输小泡等减少,特别是与胞膜融合状态下的囊泡明显减少,提示细胞内蛋白合成加工和运输的活跃度下降。同时免疫组化和免疫荧光染色发现滑膜细胞中水通道蛋白1 和水通道蛋白3 的表达范围明显下降,分布区域接近空白组,这与超微形态学结构特点相符。
图 5 |大鼠免疫荧光染色法观察滑膜水通道蛋白1 和水通道蛋白3 分布(×1 000,标尺=20 μm)Figure 5 |Immunofluorescence observation of aquaporins 1 and 3 distribution in synovial tissue (×1 000,scale bar=20 μm)图注:绿色荧光为水通道蛋白1 和水通道蛋白3 阳性区域,蓝色荧光为细胞核
水通道蛋白表达变化的原因有二:一是与滑膜细胞的数量相关,模型组滑膜细胞增生,面积变大,水通道蛋白表达总量增加,中药作用后滑膜细胞减少,水通道蛋白总量相应减少;二是模型组单个滑膜细胞内水通道蛋白的表达增加,而中药作用后明显减少,因此中药可能直接降低滑膜细胞水通道蛋白的表达。中药减少水通道蛋白的表达,从而使水的通透性下降,滑液分泌减少。
综上,透骨消痛胶囊可能通过减少水通道蛋白1 和水通道蛋白3 的表达,减少滑液分泌,改善关节水肿。研究的中药对改善关节水肿效果明显,但水通道蛋白的表达和中药作用之间的因果关系有待进一步研究。
作者贡献:实验设计为陈文列、谭春江,实验实施为冯芳芳、卢小冬、林如辉、李钻芳、黄美雅、李孝栋,实验评估为黄云梅、李西海,资料收集为冯芳芳。
文章来源:《中国实验方剂学杂志》 网址: http://www.zgsyfjxzzzz.cn/qikandaodu/2021/0304/486.html