期刊信息
主办:中国中医科学院中药研究所;中华中医药学会
主管:国家中医药管理局
ISSN:1005-9903
CN:11-3495/R
语言:中文
周期:半月
影响因子:1.817375
数据库收录:
北大核心期刊(2008版);北大核心期刊(2011版);北大核心期刊(2014版);北大核心期刊(2017版);化学文摘(网络版);中国科学引文数据库(2015-2016);中国科学引文数据库(2017-2018);中国科学引文数据库(2019-2020);日本科学技术振兴机构数据库;中国科技核心期刊;期刊分类:中药学
期刊热词:
药理
浓缩生长因子修复兔髁突全层软骨损伤(2)
【作者】网站采编
【关键词】
【摘要】1.4.4 动物模型建立及分组 离心制备浓缩生长因子的同时,全麻下于兔左侧外眦后下方约5 mm 设计长约1.5 cm水平切口,2%利多卡因行局部浸润,切开皮肤、皮
1.4.4 动物模型建立及分组 离心制备浓缩生长因子的同时,全麻下于兔左侧外眦后下方约5 mm 设计长约1.5 cm水平切口,2%利多卡因行局部浸润,切开皮肤、皮下,分离、显露并切开关节囊,暴露髁突。于髁顶处用球钻制备直径3 mm、深度约1.5 mm 的浅凹形缺损,见图1A,见骨髓腔内血液溢出,之后生理盐水冲洗。右侧髁突以同样的手术方法处理作为对照侧。无菌环境下将离心管中待用的浓缩生长因子取出,见图1B,剪成小块后填压至左侧实验侧缺损区域,右侧对照侧不做额外处理,对位缝合关节囊及皮肤。4×105U 青霉素臀部肌肉注射,1 次/d,连续3 d。常规饲料喂养,分别于术后2,6,12 周采用静脉注射过量麻药的方式分批处死动物,取双侧髁突标本,体积分数为4%甲醛溶液固定。
1.4.5 组织形态学检查 取髁突标本用体积分数为4%甲醛溶液固定48 h,以10%乙二胺四乙酸脱钙2 个月,常规石蜡包埋、切片,分别采用常规苏木精-伊红染色以及甲苯胺蓝染色,树脂封固。显微镜下观察损伤区组织形态学改变情况并分析评价,用配备有数码相机的光学显微镜拍照记录。由作者及一名病理科医生进行改良Pineda 软骨修复评分[15],见表1,讨论评判标准一致后,分别对各组实验侧及对照侧损伤区软骨修复情况进行评价,将结果汇总。
1.5 主要观察指标 苏木精-伊红染色及甲苯胺蓝染色后行修复组织形态学观察,评价损伤后修复组织的细胞形态及软骨基质染色情况,并进行改良Pineda 软骨修复评分。
1.6 统计学分析 采用单因素方差分析比较术后各时间点对照侧及实验侧的改良Pineda 软骨修复评分之间的差异,并用LSD 法行两两比较。采用单因素方差分析比较各生长因子在观测时间点间平均释放速率的差异,并用LSD 法行两两比较。所有数据均采用IBM SPSS 21.0 软件(美国)进行统计分析,P< 0.05 为差异有显著性意义。
表1 | 改良Pineda 软骨修复评分Table 1 |Modified Pineda cartilage repair scale评价指标 得分细胞形态学表现 透明软骨 0大部分为透明软骨 1大部分为纤维软骨 2大部分为非软骨 3仅为非软骨 4基质染色情况 正常 0轻度减退 1明显减退 2无染色 3表面规则度 光滑(规则表面>3/4) 0中等(1/2<规则表面<3/4) 1不规则(1/4<规则表面<1/2) 2严重不规则(规则表面<1/4) 3修复软骨厚度 >2/3 0 1/3-2/3 1<1/3 2与邻近软骨融合情况 两侧边缘融合 0一侧边缘融合 1两侧均未融合 2总分 14组织工程实验动物造模过程的相关问题造模目的: 研究浓缩生长因子对兔下颌骨髁突全层软骨损伤后修复的影响选择动物的基本资料:日本大耳白兔,雄性,6 月龄,2.5 kg 左右模型与所研究疾病的关系:兔双侧下颌骨髁突全层软骨损伤模型,与全层软骨损伤病理表现相一致造模技术描述: 全麻下于兔双侧外眦后下方约5 mm设计长约1.5 cm水平切口,2%利多卡因行局部浸润,切开皮肤、皮下,分离、显露并切开关节囊,暴露髁突,于髁顶处用球钻制备直径3 mm、深度约1.5 mm 的浅凹形缺损动物数量及分组方法:选取日本大耳白兔20 只,其中空白对照组2 只,取双侧髁突,其余手术制备双侧下颌骨髁突全层软骨损伤模型,左侧为实验侧置入浓缩生长因子,右侧为对照侧不做额外处理,并按照手术损伤时间分为2,6,12 周组,各6 只造模成功评价指标:软骨损伤大体观、组织切片改良Pineda 软骨修复评分造模后取材及观察指标:采用苏木精-伊红染色及甲苯胺蓝染色行修复组织形态学观察,评价细胞形态及软骨基质染色情况,并采用改良Pineda 软骨修复评分伦理委员会批准及批号:该实验经过北京大学医学部动物伦理委员会审核批准(LA)
2 结果 Results
2.1 实验动物数量分析 选取日本大耳白兔20 只,均进入结果分析,中途无脱落。
2.2 组织形态学观察结果 各组实验侧及对照侧的苏木精-伊红染色以及甲苯胺蓝染色结果见图2 所示。
空白对照组:可见兔颞下颌关节髁突软骨组织分为表层、增殖层、肥大层及钙化软骨层,各层组织清晰连续,见图2A,B。
术后2 周组:实验侧损伤区见纤维样及软骨样组织充填(5/6),部分切片修复组织与周围软骨表面基本平齐(3/6),部分切片修复组织中心凹陷低于周围软骨表面(2/6)。修复组织内细胞形态较小,周围软骨基质丰富,甲苯胺蓝染色异染(5/6)。修复组织内可见致密纤维样组织团块,周围软骨样细胞包绕,内含丰富的小圆形细胞,见图2C,甲苯胺蓝染色较均匀(4/6),见图2D。1 只实验侧见损伤区凹陷,表面仅纤维样组织覆盖,甲苯胺蓝染色不着色(1/6)。对照侧损伤区内见纤维样及软骨样组织充填(6/6),部分切片修复组织与周围软骨表明基本平齐(4/6),部分切片修复组织高于周围软骨表面(2/6),修复组织浅层细胞形态较小,深层多见肥大样细胞,并可见细胞间纤维样组织交织穿插,似纤维样分隔及裂隙(5/6),见图2E。修复组织软骨基质丰富,但甲苯胺蓝染色不均匀,纤维样分隔组织处甲苯胺蓝染色减弱,见图2F。
文章来源:《中国实验方剂学杂志》 网址: http://www.zgsyfjxzzzz.cn/qikandaodu/2021/0402/549.html
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